附件：病原體特異性M型免疫球蛋白定性檢測(cè)試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2023年修訂版）（2024年第1號(hào)）.doc

病原體特異性M型免疫球蛋白定性檢測(cè)試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2023年修訂版）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)病原體特異性M型免疫球蛋白（Immunoglobulin M，IgM）定性檢測(cè)試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的技術(shù)審評(píng)提供參考。

本指導(dǎo)原則是對(duì)病原體特異性IgM抗體定性檢測(cè)試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是對(duì)申請(qǐng)人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊(cè)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

在病原體感染的初次體液免疫應(yīng)答中(原發(fā)性感染)，特異性IgM抗體首先出現(xiàn)，但其普遍反應(yīng)短暫，一般幾周后即不易再測(cè)到。病原體特異性IgM抗體陽性常提示早期感染，可用于感染急性期的輔助判斷。人血液樣本中病原體特異性IgM抗體的定性檢測(cè)，對(duì)某些傳染病如甲型肝炎、乙型肝炎、弓形蟲、風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒及單純皰疹病毒（TORCH）類病原體感染等有較高的臨床參考價(jià)值。

病原體特異性IgM抗體定性檢測(cè)試劑是指利用酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)發(fā)光法等基于抗原抗體反應(yīng)原理，以特定病原體的特異性IgM抗體為檢測(cè)目標(biāo)，對(duì)人血清或血漿等樣本中病原體特異性IgM抗體進(jìn)行體外定性檢測(cè)的試劑。本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行注冊(cè)申請(qǐng)和變更注冊(cè)的情形。

二、注冊(cè)審查要點(diǎn)

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱及分類編碼

產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求，如甲型肝炎病毒IgM抗體檢測(cè)試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。

2.其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報(bào)前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品臨床適用證背景情況、預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評(píng)價(jià)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)及臨床適用范圍等方面寫明擬申報(bào)產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

建議申請(qǐng)人對(duì)以下幾方面內(nèi)容進(jìn)行著重介紹：

1.特定病原體的生物學(xué)特性、結(jié)構(gòu)與功能、感染過程、潛伏期、特異性IgM抗體產(chǎn)生及可持續(xù)存在時(shí)間、病理背景等。

2.特定病原體感染相關(guān)的疾病情況、流行病學(xué)以及易患（高危）人群的說明。

3.對(duì)申報(bào)試劑檢測(cè)結(jié)果可能帶來的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行合理評(píng)估，即由申報(bào)試劑的假陽性/假陰性結(jié)果導(dǎo)致的對(duì)患者臨床診治、孕婦或胎兒的不恰當(dāng)處理、疫苗接種、流行病學(xué)等方面的負(fù)面影響。

4.申報(bào)產(chǎn)品的研發(fā)歷程。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告

注冊(cè)申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評(píng)價(jià)等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，結(jié)合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。

病原體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑的注冊(cè)檢測(cè)應(yīng)主要包括以下性能指標(biāo)：物理性狀、陽性參考品符合率、陰性參考品符合率、精密度、最低檢測(cè)限（分析靈敏度）等。

如有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應(yīng)不低于相應(yīng)的要求。

如該項(xiàng)目已有國家標(biāo)準(zhǔn)品，產(chǎn)品技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)。

2.分析性能研究

申請(qǐng)人應(yīng)提交在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的試劑進(jìn)行的所有性能評(píng)估資料，包括具體研究方法、試驗(yàn)方案、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能評(píng)估的背景信息也應(yīng)在申報(bào)資料中進(jìn)行描述，包括試驗(yàn)地點(diǎn)，采用的試劑名稱、規(guī)格和批號(hào)，儀器名稱和型號(hào)，樣本類型和來源等。分析性能評(píng)估的試驗(yàn)方法可以參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷試劑性能評(píng)估的指導(dǎo)原則進(jìn)行，建議著重對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究。

2.1樣本穩(wěn)定性

樣本穩(wěn)定性一般包括樣本各種實(shí)際運(yùn)輸及儲(chǔ)存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗(yàn)證，以確認(rèn)樣本的保存條件及效期（短期、長(zhǎng)期）。需要冷凍保存的樣本同時(shí)應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行合理驗(yàn)證。某些用于防腐、冷凍用途或起穩(wěn)定保護(hù)作用的添加劑可能會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響，如涉及，請(qǐng)對(duì)該添加劑的影響進(jìn)行合理驗(yàn)證。若要用于加熱樣本（如熱滅活）的檢測(cè)，則應(yīng)對(duì)加熱前后的病原體特異性IgM抗體陽性及陰性樣本進(jìn)行加熱因素的干擾驗(yàn)證。

2.2適用的樣本類型

如產(chǎn)品適用于血清和血漿，可采用同源比對(duì)驗(yàn)證樣本的可比性。方法為對(duì)不少于50例源自同一患者的病原體特異性IgM抗體陰性、弱陽性（略高于臨界值）的血清和血漿樣本進(jìn)行檢測(cè)以驗(yàn)證申報(bào)試劑對(duì)于血清和血漿樣本的檢測(cè)結(jié)果的一致性。如產(chǎn)品適用于靜脈全血，建議進(jìn)行最低檢測(cè)限和精密度研究，同時(shí)進(jìn)行同源比對(duì)試驗(yàn)。

2.3企業(yè)參考品檢驗(yàn)

根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用至少三批產(chǎn)品對(duì)企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗(yàn)并提供詳細(xì)的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

2.4最低檢測(cè)限

選取特定濃度/滴度的病原體特異性IgM抗體樣本，做系列稀釋，將檢測(cè)結(jié)果的陽性率不低于95%（n≥20）的最大稀釋倍數(shù)作為試劑盒的最低檢測(cè)限。選擇與確定樣本不同的多份樣本，采用陰性樣本稀釋到最低檢測(cè)限濃度水平進(jìn)行驗(yàn)證，應(yīng)不低于95%陽性檢出率。

2.5分析特異性

2.5.1交叉反應(yīng)

用于病原體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑交叉反應(yīng)驗(yàn)證主要考慮以下幾方面：

2.5.1.1對(duì)抗原結(jié)構(gòu)相近或臨床癥狀相似的其他病原體高水平IgM抗體進(jìn)行交叉反應(yīng)研究，如乙型肝炎病毒核心抗體（HBc）IgM、甲型肝炎病毒（HAV）IgM、弓形蟲、風(fēng)疹病毒、單純皰疹病毒以及巨細(xì)胞病毒IgM抗體等。

2.5.1.2高濃度病原體特異性IgG抗體與特異性IgM抗體的交叉反應(yīng)驗(yàn)證。

2.5.1.3如果試劑原料采用基因重組抗原，則還需考慮對(duì)重組基因?qū)胛⑸锾禺愋钥贵w的交叉反應(yīng)評(píng)價(jià)。

申請(qǐng)人應(yīng)提交所有用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證的樣本來源、濃度或滴度確認(rèn)等信息。

2.5.2干擾物質(zhì)

應(yīng)根據(jù)所采集樣本類型，選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行研究。建議在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度下，采用病原體特異性IgM抗體陰性、弱陽性（略高于臨界值）的臨床或模擬添加樣本分別進(jìn)行干擾試驗(yàn)驗(yàn)證。應(yīng)說明樣本的制備方法及干擾試驗(yàn)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。

2.5.2.1內(nèi)源性干擾

對(duì)樣本中常見的內(nèi)源性干擾物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，如溶血、高脂、黃疸、類風(fēng)濕因子（RF）、抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）、高濃度非特異性IgG和IgM抗體等進(jìn)行干擾研究。

2.5.2.2常見治療性藥物

對(duì)不同種類的抗菌藥物、干擾素、常見的抗病毒藥物、癥狀相關(guān)其他經(jīng)驗(yàn)性藥物等進(jìn)行干擾研究。

2.5.2.3抗凝劑的干擾

如果試劑盒適用樣本類型包括血漿和/或靜脈全血樣本，應(yīng)采用各種適用抗凝劑抗凝的血漿和/或靜脈全血樣本分別與血清樣本進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究。

2.5.2.4對(duì)至少5份含有病原體特異性IgM抗體的樣本進(jìn)行IgM破壞試驗(yàn)研究，方法為采用特定的化學(xué)制劑（如2－巰基乙醇或二硫蘇糖醇）處理樣本后，重新進(jìn)行檢測(cè)，IgM檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陰性。

2.6精密度

申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)每項(xiàng)精密度指標(biāo)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)的范圍等，針對(duì)本類產(chǎn)品的精密度評(píng)價(jià)主要包括以下要求。

2.6.1對(duì)可能影響檢測(cè)精密度的主要變量進(jìn)行驗(yàn)證，除申報(bào)試劑本身外，還應(yīng)對(duì)運(yùn)行、時(shí)間、操作者、儀器、試劑批次和地點(diǎn)等影響檢測(cè)精密度的主要變量進(jìn)行相關(guān)的驗(yàn)證。

2.6.2設(shè)定合理的精密度評(píng)價(jià)周期。

2.6.3用于精密度評(píng)價(jià)的臨床樣本應(yīng)至少包括三個(gè)水平:

2.6.3.1陰性樣本：待測(cè)物濃度為零，陰性符合率應(yīng)為100%（n≥20）。

2.6.3.2弱陽性樣本：待測(cè)物濃度略高于試劑的最低檢測(cè)限，陽性符合率應(yīng)不低于95%（n≥20）。

2.6.3.3中/強(qiáng)陽性樣本：待測(cè)物濃度呈中到強(qiáng)陽性，陽性符合率為100%，且CV≤15%（n≥20）（如適用）。

2.7鉤狀（HOOK）效應(yīng)（如適用）

須采用高滴度的病原體特異性IgM抗體的樣本進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度開始檢測(cè)，每個(gè)梯度的稀釋液重復(fù)3～5份，對(duì)鉤狀效應(yīng)進(jìn)行合理的驗(yàn)證。

2.8包容性

應(yīng)選擇來源于不同時(shí)間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定的病原體特異性IgM抗體弱陽性的患者樣本進(jìn)行研究。

2.9其他需注意問題

對(duì)于使用儀器進(jìn)行結(jié)果判讀的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用機(jī)型】項(xiàng)中所有型號(hào)儀器的性能評(píng)估資料。

2.10反應(yīng)體系

2.10.1反應(yīng)條件確定

申請(qǐng)人應(yīng)考慮反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度、洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。

2.10.2反應(yīng)體系中樣品加樣方式及加樣量確定

申請(qǐng)人應(yīng)考慮樣品加樣方式、加樣量對(duì)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的影響，通過試驗(yàn)確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測(cè)，申請(qǐng)人還應(yīng)對(duì)可用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法進(jìn)行研究，通過試驗(yàn)確定最終選擇的用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法。

采用間接法的試劑，建議考慮高濃度特異性IgG對(duì)結(jié)果的影響，合理設(shè)置IgG去除相關(guān)樣本處理步驟（例如采用含有IgG吸附劑的樣本稀釋液等），或者詳述產(chǎn)品設(shè)計(jì)中關(guān)于避免IgG影響IgM檢測(cè)結(jié)果的合理措施，盡量減少特異性IgG對(duì)IgM檢測(cè)造成的假陰性和假陽性。對(duì)至少10份臨界值附近的病原體特異性IgM抗體弱陽性并含有多水平病原體特異性IgG抗體的樣本進(jìn)行檢測(cè)，比較去除總IgG前后的結(jié)果，驗(yàn)證IgG吸附劑消除干擾的效果，以上試驗(yàn)可以采用人工制備的樣本進(jìn)行。

3.穩(wěn)定性研究

穩(wěn)定性研究主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、使用穩(wěn)定性及運(yùn)輸穩(wěn)定性等研究，申請(qǐng)人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對(duì)于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

4.陽性判斷值研究

應(yīng)提交對(duì)申報(bào)試劑陰性/灰區(qū)/陽性等結(jié)果判斷的陽性判斷值確定的試驗(yàn)研究資料，應(yīng)包括具體的試驗(yàn)方案、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析、研究數(shù)據(jù)等研究資料。如適用，建議采用受試者工作特征曲線（ROC）的分析方式來選擇確定合理的陽性判斷值，如試驗(yàn)結(jié)果分析存在灰區(qū)，則應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。建立陽性判斷值的樣本來源選擇應(yīng)考慮到地域性、年齡、不同生理狀態(tài)等因素的影響，并明確陽性判斷值在不同的樣本類型是否有差異。應(yīng)搜集采用分布均勻的真實(shí)樣本對(duì)所確定的陽性判斷值進(jìn)行驗(yàn)證。注意，陽性判斷值的驗(yàn)證樣本不應(yīng)與陽性判斷值的確定樣本以及臨床試驗(yàn)樣本重復(fù)。

5.其他資料

5.1主要原材料研究資料

5.1.1試劑盒所用病原體抗原

應(yīng)注重抗原表位的選擇，原材料研究資料中應(yīng)將此方面的考慮進(jìn)行詳述。詳細(xì)描述抗原的名稱，天然/重組表達(dá)信息及選擇該抗原的依據(jù)。提交抗原來源、供應(yīng)商選擇、制備、純化、鑒定、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗(yàn)等）及檢驗(yàn)等詳細(xì)試驗(yàn)資料。

（1）企業(yè)自制抗原

如為天然抗原，則應(yīng)對(duì)病原體毒株選擇、病原體培養(yǎng)、抗原提取及純化、鑒定等試驗(yàn)過程予以詳述；如為重組抗原，則應(yīng)提交有關(guān)特定基因選擇、基因序列、基因克隆、抗原表達(dá)及抗原純化鑒定等詳細(xì)內(nèi)容，并對(duì)基因克隆的整個(gè)過程進(jìn)行詳述，如特定脫氧核糖核酸（DNA）分子的體外處理、重組連接、導(dǎo)入宿主細(xì)胞、宿主細(xì)胞繁殖以及重組子表達(dá)等試驗(yàn)過程。

（2）企業(yè)外購抗原，則應(yīng)詳述抗原的名稱及生物學(xué)來源，供應(yīng)商名稱，提交供應(yīng)商出具的抗原性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書，詳述申請(qǐng)人對(duì)該抗原技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請(qǐng)人確定該抗原作為主要原材料的依據(jù)。供應(yīng)商應(yīng)相對(duì)固定，不得隨意更換。

5.1.2試劑盒所用病原體抗體

詳述抗體的選擇過程，提交抗體生物學(xué)來源、免疫原及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價(jià)、功能性試驗(yàn)等）等詳細(xì)試驗(yàn)資料。

（1）企業(yè)自制抗體

如使用天然抗原作為免疫原則應(yīng)明確該天然抗原的來源；如使用重組抗原或其他人工合成抗原作為免疫原，應(yīng)提供相應(yīng)的核酸組分及重組抗原的序列信息。申請(qǐng)人對(duì)所選抗體的技術(shù)指標(biāo)要求，確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。

（2）企業(yè)外購抗體

應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，供應(yīng)商名稱，提交供應(yīng)商出具的抗體性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書，詳述申請(qǐng)人對(duì)該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請(qǐng)人確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。供應(yīng)商應(yīng)相對(duì)固定，不得隨意更換。

5.1.3其他主要原材料

除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他原材料，如固相載體、硝酸纖維素膜、反應(yīng)緩沖液等，該類原材料一般均為外購，應(yīng)詳述每一原材料的供應(yīng)商名稱，提交供應(yīng)商出具的每一原材料性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書，詳述申請(qǐng)人對(duì)每一原材料技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請(qǐng)人確定該原材料作為主要原材料的依據(jù)。免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品如適用于全血，應(yīng)介紹血細(xì)胞去除方式及相關(guān)原材料，并驗(yàn)證去除效果。

5.1.4企業(yè)參考品

應(yīng)提供企業(yè)參考品的原料選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認(rèn)等相關(guān)的驗(yàn)證資料，提供對(duì)參考品性質(zhì)確認(rèn)的方法或試劑（建議采用國內(nèi)已上市的、臨床上普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類試劑）的相關(guān)信息。

如申報(bào)產(chǎn)品有相應(yīng)的國家參考品，則企業(yè)參考品應(yīng)參考國家參考品的項(xiàng)目設(shè)置。在不低于國家參考品要求的前提下，申請(qǐng)人可以結(jié)合實(shí)際情況設(shè)置合理的企業(yè)參考品。對(duì)于沒有國家參考品的產(chǎn)品，申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品性能驗(yàn)證的實(shí)際情況自行設(shè)定企業(yè)參考品，陽性參考品應(yīng)著重考慮抗體滴度要求，陰性參考品則主要涉及對(duì)分析特異性（交叉反應(yīng)）的驗(yàn)證情況。

5.2生產(chǎn)工藝研究資料

5.2.1主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

5.2.2產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。

5.2.3包被工藝研究，申請(qǐng)人應(yīng)考慮如包被液量、濃度、時(shí)間等指標(biāo)對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述指標(biāo)的最佳組合。

5.2.4顯色（發(fā)光）系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹及最適條件研究。

（四）臨床試驗(yàn)資料

臨床試驗(yàn)的開展、方案的制定以及報(bào)告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗(yàn)應(yīng)符合更新后的要求。

1.臨床試驗(yàn)方法

1.1對(duì)于有已上市同類產(chǎn)品的試驗(yàn)體外診斷試劑，采用試驗(yàn)體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品（對(duì)比試劑）進(jìn)行比較研究，評(píng)價(jià)兩種方法檢測(cè)結(jié)果的一致性，評(píng)價(jià)指標(biāo)通常包括陽性符合率、陰性符合率等。對(duì)比試劑在預(yù)期用途、適用人群、樣本類型、檢測(cè)方法學(xué)、檢測(cè)性能等方面應(yīng)與試驗(yàn)體外診斷試劑具有較好的可比性。

1.2對(duì)于尚無已上市同類產(chǎn)品的試驗(yàn)體外診斷試劑，應(yīng)結(jié)合臨床指南等資料，明確IgM檢測(cè)的臨床意義。根據(jù)臨床意義，申請(qǐng)人可選擇病原體急性感染檢測(cè)的臨床參考標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合臨床診斷進(jìn)行比較研究。如病原體分離培養(yǎng)鑒定。如果病原體分離培養(yǎng)鑒定的方法不可行也可以采用其他用于感染急性期判斷的方法進(jìn)行比對(duì)研究，例如：病原體IgG抗體的血清學(xué)轉(zhuǎn)換（動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)2份或以上的血清IgG，恢復(fù)期與急性期比較IgG呈4倍以上升高）、病原體核酸檢測(cè)或直接抗原檢測(cè)等方法。對(duì)于病原體感染急性期的判斷應(yīng)按照臨床指南等資料的描述確定。

還應(yīng)納入一定量的連續(xù)樣本，觀察其轉(zhuǎn)歸情況。

針對(duì)不一致的樣本，建議進(jìn)一步隨訪其IgM的檢測(cè)情況并確認(rèn)病例的感染狀態(tài)，綜合臨床其他因素進(jìn)行分析。

2.受試者選擇及樣本收集

2.1受試者選擇

臨床試驗(yàn)方案中應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)用體外診斷試劑的預(yù)期用途、目標(biāo)人群和檢測(cè)要求等合理確定臨床試驗(yàn)受試者的選擇要求和樣本收集方法，包括：受試者入組/排除標(biāo)準(zhǔn)等。

根據(jù)產(chǎn)品臨床驗(yàn)證的目的，入組人群應(yīng)選擇具有特定病原體感染癥狀/體征、相似癥狀或有密切接觸史等疑似特定病原體感染人群作為研究對(duì)象。還應(yīng)納入靶病原體之外的其他感染癥狀相似的、易混淆的病原體感染的患者樣本，以從臨床角度考察其特異性。

2.2樣本類型

病原體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑適用的樣本類型一般包括血清、血漿、靜脈全血。如申報(bào)產(chǎn)品所適用的樣本類型同時(shí)包含血清、血漿，且臨床前研究證實(shí)檢測(cè)性能沒有差異（如血清、血漿），則臨床試驗(yàn)中可匯總統(tǒng)計(jì)。

對(duì)于靜脈全血樣本類型，建議進(jìn)行同源比對(duì)。

3.臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)數(shù)量和要求

應(yīng)選擇不少于3家（含3家）已備案的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，按照相關(guān)法規(guī)、指導(dǎo)原則的要求開展臨床試驗(yàn)。申辦者應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)及其預(yù)期用途，綜合不同地區(qū)病原體流行情況等因素選擇具有代表性的機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)，包括受試人群的代表性等。

4.臨床評(píng)價(jià)指標(biāo)

該類產(chǎn)品臨床評(píng)價(jià)指標(biāo)主要包括試驗(yàn)用體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品相比的陽性符合率、陰性符合率等。如試驗(yàn)用體外診斷試劑與臨床參考方法進(jìn)行對(duì)比研究，其臨床評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括臨床靈敏度、臨床特異度等。

5.臨床試驗(yàn)樣本量估算

臨床試驗(yàn)樣本量應(yīng)滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，可采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行估算，同時(shí)應(yīng)滿足法規(guī)最低樣本量的要求。

臨床試驗(yàn)采用申報(bào)產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行比對(duì)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，臨床樣本量的估算建議采用單組目標(biāo)值法進(jìn)行計(jì)算，陰陽性符合率的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)（P0）建議不低于90%。當(dāng)評(píng)價(jià)指標(biāo)P接近100%時(shí)，該樣本量估算方法可能不適用，應(yīng)考慮選擇更加適宜的方法進(jìn)行樣本量估算和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，如精確概率法等。

公式中，n為樣本量；Z1-α/2、Z1-β為顯著性水平和把握度的標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布的分?jǐn)?shù)位，P0為評(píng)價(jià)指標(biāo)的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)，PT為試驗(yàn)體外診斷試劑評(píng)價(jià)指標(biāo)預(yù)期值。

對(duì)于無已上市產(chǎn)品的新的試驗(yàn)體外診斷試劑，靈敏度特異性的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)參照相關(guān)文獻(xiàn)及前期研究結(jié)果設(shè)定合理的指標(biāo)。

臨床試驗(yàn)總體樣本量確定時(shí)應(yīng)在上述陰、陽性樣本最低樣本量估算的基礎(chǔ)上，同時(shí)考慮其他可能造成受試者脫落的情況以及可能需要納入的干擾樣本、交叉反應(yīng)樣本等情況適當(dāng)增加入組樣本量。

6.統(tǒng)計(jì)分析

臨床試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析，應(yīng)與臨床試驗(yàn)?zāi)康囊恢?，如臨床試驗(yàn)?zāi)康臑轵?yàn)證申報(bào)產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品的一致性，統(tǒng)計(jì)分析一般以2×2四格表的形式總結(jié)兩種分析方法的檢測(cè)結(jié)果，并據(jù)此計(jì)算陽性符合率、陰性符合率、總符合率、Kappa值等指標(biāo)及其95%置信區(qū)間。

對(duì)于采取與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)比較的臨床試驗(yàn)，考慮到對(duì)不同樣本類型以及不同人群的檢測(cè)結(jié)果可能存在一定差異，故建議根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)，對(duì)不同樣本類型及不同人群分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以對(duì)考核試劑的臨床性能進(jìn)行綜合分析。

7.倫理學(xué)要求

臨床試驗(yàn)必須符合赫爾辛基宣言的倫理學(xué)準(zhǔn)則，必須獲得臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)的同意。研究者應(yīng)充分考慮臨床試驗(yàn)用樣本的獲得和試驗(yàn)結(jié)果對(duì)受試者的風(fēng)險(xiǎn)性，應(yīng)提交倫理委員會(huì)的審查意見。

8.質(zhì)量控制

臨床試驗(yàn)開始前，建議進(jìn)行臨床試驗(yàn)的預(yù)試驗(yàn)，以熟悉并掌握相關(guān)試驗(yàn)方法的操作、儀器、技術(shù)性能等，最大限度控制試驗(yàn)誤差。整個(gè)試驗(yàn)過程都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

9.臨床試驗(yàn)報(bào)告和小結(jié)撰寫

臨床試驗(yàn)報(bào)告和小結(jié)的撰寫應(yīng)參考《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求，應(yīng)該對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對(duì)整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。

（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)注明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，病原體特異性IgM抗體定性檢測(cè)試劑說明書編寫應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注以下內(nèi)容。

1.【預(yù)期用途】應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

1.1試劑盒用于體外定性檢測(cè)人血清和/或血漿和/或靜脈全血樣本中xx的特異性IgM抗體。用于xx感染的輔助診斷。

1.2簡(jiǎn)單介紹待測(cè)目標(biāo)的特征，如特定病原體的生物學(xué)性狀、潛伏期、易感人群、感染后的臨床表現(xiàn)等臨床背景相關(guān)的信息介紹；適用于對(duì)哪些患者人群的檢測(cè)，如具有何種癥狀/體征的患者、相關(guān)的密切接觸者、地域要求或年齡限制（如有）等。

1.3病原體特異性IgM抗體的產(chǎn)生、持續(xù)時(shí)間、與特異性IgG、病原體核酸等其他檢測(cè)指標(biāo)的關(guān)聯(lián)；

1.4與靶抗體檢測(cè)相關(guān)的其他臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法。

2.【主要組成成分】

2.1說明試劑盒包含組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息，陰性/陽性對(duì)照品可能含有人源組分，應(yīng)提供其生物學(xué)來源。

2.2對(duì)檢測(cè)中使用的抗原及抗體的信息進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹。

2.3試劑盒中不包含但對(duì)該項(xiàng)檢測(cè)必須的組分，企業(yè)應(yīng)列出相關(guān)試劑/耗材的名稱、注冊(cè)證號(hào)/備案號(hào)（如有）、貨號(hào)及其他相關(guān)信息。

3.【儲(chǔ)存條件及有效期】

對(duì)試劑盒的效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性等信息做詳細(xì)介紹。

膠體金試紙條產(chǎn)品應(yīng)對(duì)開封后未使用產(chǎn)品允許暴露于空氣中的溫度、濕度及期限等條件予以明確。

4.【樣本要求】 重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：

4.1樣本采集前對(duì)患者的要求：如采集時(shí)間、采集順序等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。

4.2樣本采集：說明采集方法及樣本類型，如有血漿樣本，應(yīng)注明對(duì)抗凝劑的要求。

4.3樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件及期限（短期、長(zhǎng)期）、運(yùn)輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)。經(jīng)熱處理樣本是否可用、對(duì)儲(chǔ)存樣本的添加劑要求等。

4.4如果檢測(cè)系統(tǒng)含有某種IgG抗體的去除技術(shù)（IgG吸附劑），如抗人IgG抗體等，則應(yīng)包括IgG吸附劑使用相關(guān)的注意事項(xiàng)。例如：經(jīng)IgG吸附劑處理的樣本不能用于 IgG類抗體的檢測(cè)；在檢測(cè)IgM類抗體的同時(shí)，檢測(cè)處理過的混合物中的IgG類抗體，以證實(shí)對(duì)IgG、類風(fēng)濕因子（RF）等去除的有效性等。

5.【檢驗(yàn)方法】 詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟：

5.1試驗(yàn)環(huán)境：溫、濕度條件，檢測(cè)試劑及樣本的復(fù)溫要求及相關(guān)注意事項(xiàng)。例如：凍存樣本在復(fù)融后應(yīng)經(jīng)過充分的混勻再行檢測(cè)。

5.2試劑配制方法、注意事項(xiàng)，試劑開封后使用方法及注意事項(xiàng)等。

5.3試驗(yàn)條件：操作步驟、溫度、時(shí)間、儀器波長(zhǎng)等以及試驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)。不同型號(hào)產(chǎn)品，加樣方法如有差異，建議分別以圖示方式描述清楚。

6.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

結(jié)果判斷或計(jì)算：詳細(xì)描述對(duì)檢測(cè)結(jié)果的判定或計(jì)算方法、對(duì)質(zhì)控品（對(duì)照品）的檢測(cè)結(jié)果要求（試驗(yàn)有效性的判斷）等。如果質(zhì)控品和病人樣本的使用方法不同，生產(chǎn)商應(yīng)注明必要的指導(dǎo)和解釋。建議在質(zhì)控品（對(duì)照品）結(jié)果解釋環(huán)節(jié)注明以下字樣：“如果質(zhì)控結(jié)果與預(yù)期不符，實(shí)驗(yàn)室不應(yīng)出具檢測(cè)報(bào)告?！?/p>

7.【檢驗(yàn)方法局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測(cè)方法及適用范圍等信息，對(duì)可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說明，主要包括以下描述，請(qǐng)申請(qǐng)人選擇適用的條款在產(chǎn)品說明書中予以闡述。

7.1本產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，不應(yīng)作為臨床診治的唯一依據(jù)，對(duì)患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查（尤其是病原學(xué)檢測(cè)）、治療反應(yīng)及流行病學(xué)等信息綜合考慮。

7.2感染初期，病原體特異性IgM抗體未產(chǎn)生或滴度很低會(huì)導(dǎo)致陰性結(jié)果，如懷疑有病原體感染，應(yīng)提示患者在7－14天內(nèi)復(fù)查，抽取第二份樣本，并和第一份樣本在同條件下同時(shí)檢測(cè)，以確定是否有初次感染的血清轉(zhuǎn)化或病原體特異IgM或IgG抗體滴度明顯升高。

7.3高滴度病原體特異性IgG抗體會(huì)與特異性IgM抗體競(jìng)爭(zhēng)抗原結(jié)合部位，會(huì)使檢測(cè)的敏感性降低，IgM結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)假性低值或陰性結(jié)果。尤其是懷疑先天性病原體感染的新生兒樣本，他們的血清中可能含有母親來源的高水平病原體特異的IgG抗體和胎兒產(chǎn)生的相對(duì)低水平的病原體特異IgM抗體，因此，對(duì)于該類樣本的陰性結(jié)果應(yīng)慎重分析。

7.4由于臍帶血中可能含有源于母體的病原體特異性IgM抗體（胎盤滲漏），因此，最好在出生后5天內(nèi)再對(duì)嬰兒的后續(xù)樣本進(jìn)行檢測(cè)，以證實(shí)臍帶血樣本病原體特異性IgM抗體的陽性結(jié)果。建議將新生兒與母親的血清樣本平行進(jìn)行測(cè)試，如果是胎兒的先天性感染,其IgM抗體水平(以及IgG抗體水平) 會(huì)持續(xù)存在或呈上升趨勢(shì), 反之,如果抗體來源于母體，則在在平行試驗(yàn)中嬰兒的抗體水平會(huì)逐漸下降或消失。

7.5由于孕婦的實(shí)驗(yàn)室檢查不能可靠地鑒定胎兒患病的風(fēng)險(xiǎn)，故不建議采用本試劑對(duì)無癥狀的母體感染進(jìn)行篩查，不得將本試劑的檢測(cè)結(jié)果單獨(dú)作為終止妊娠的依據(jù)。

7.6免疫功能受損或接受免疫抑制治療的患者，如人類免疫缺陷病毒（HIV）感染患者或器官移植后接受免疫抑制治療的患者，其血清學(xué)IgM抗體檢測(cè)的參考價(jià)值有限，可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的醫(yī)學(xué)解釋。

7.7在近幾個(gè)月內(nèi)接受過輸血或其他血液制品治療的人群，對(duì)其陽性檢測(cè)結(jié)果的分析應(yīng)慎重。

7.8病原體特異性IgM抗體不僅出現(xiàn)于初次感染，當(dāng)二次感染和復(fù)發(fā)感染時(shí)也可能出現(xiàn)。

7.9當(dāng)疾病的流行程度降低時(shí)陽性預(yù)測(cè)值降低，對(duì)低危人群陽性結(jié)果的解釋應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎。建議對(duì)申報(bào)試劑臨床研究中的病例人群特征進(jìn)行說明，并對(duì)適用人群的性別、年齡、地域等特征進(jìn)行明示。

8.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 詳述以下性能指標(biāo)：

8.1最低檢測(cè)限：說明試劑的最低檢測(cè)限，簡(jiǎn)單介紹最低檢測(cè)限的確定方法。

8.2企業(yè)陽性/陰性參考品符合率。

8.3精密度：精密度參考品的組分、濃度及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。

8.4分析特異性

8.4.1交叉反應(yīng)：對(duì)易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他病原體的高水平IgM抗體、特異性IgG抗體等的驗(yàn)證情況。

8.4.2干擾物質(zhì)：樣本中常見干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，如溶血、高脂、黃疸等干擾因子研究（結(jié)果應(yīng)量化表示，禁用輕度、嚴(yán)重等模糊表述），有關(guān)高濃度總IgM和IgG抗體、自身抗體、類風(fēng)濕因子（RF）、嗜異型性抗體等的干擾驗(yàn)證。

8.4.3藥物影響：較常見的用于病原體感染治療的外用或內(nèi)服藥物對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。

8.5鉤狀（HOOK）效應(yīng)（如適用）：對(duì)高濃度特異性IgM抗體的鉤狀效應(yīng)驗(yàn)證情況。

8.6對(duì)比試驗(yàn)研究（如有）：簡(jiǎn)要介紹對(duì)比試劑（方法）的信息、所采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。

8.7臨床性能。

9.【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

9.1有關(guān)試劑盒內(nèi)人源組分（如有）生物安全性的警告。

9.2有關(guān)試驗(yàn)操作、樣本保存及處理等其他注意事項(xiàng)。

三、參考文獻(xiàn)

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